Основной принцип электрофореза

Электрофорез

Основная Принцип электрофореза

Электрофорез относится к процесс заряженных частиц мигрировать в электрическом поле. Многие важные биологические молекулы, такие как аминокислоты, пептиды, белки, нуклеотиды, нуклеиновые кислоты и т.д., имеющих ионизирующихся групп, они могут быть положительно или отрицательно заряженных на определенном значении рН, под действием электрического поля, заряженный привел его молекулы двигаться к противоположному электроду заряда направлении полярности. Методика электрофореза является использование в электрическом поле, сама молекула, а разница в зависимости от размера, формы и других свойств различных молекул, которые будут разделены в зарядки свойств образца, заряженные молекулы имеют различные скорости миграции, и, таким образом, Образцы были выделены, идентифицированы и очищены технологии.

Процесс электрофореза должны быть выполнены в опорной среде. Тицелиусу и др. 1937 бесплатно электрофорез интерфейс не осуществляется не из фиксированного вещества, что распространение и конвекции, чем сильным влиянием разделения. Таким образом, существует неподвижную опору среда электрофореза образцы подвергают процессу электрофореза в фиксированном среды, уменьшение диффузии помех эффекта и конвекции. Начальная поддержка среда бумага и ацетата целлюлозы мембраны, в настоящее время эти средства в лаборатории был применен меньше. В течение длительного периода времени, небольшие молекулы, такие как аминокислоты, пептиды, сахара или т.п., как правило, проводят с использованием фильтровальной бумаги из целлюлозы, силикагель тонкослойной пластины для электрофоретического разделения среды, анализа, но, как правило, с использованием более чувствительных методов такие как ВЭЖХ и т.п. анализировали. Эти средства, пригодные для разделения малых молекул, простых и удобных. Но для разделения сложных биологических макромолекул менее эффективной. Гель качестве опорной среды, введенной в значительной степени способствовали развитию электрофореза технологии, технология стала важным средством электрофоретического анализа белков, нуклеиновых кислот и других биологических макромолекул. Гель вначале с помощью крахмальном геле, но наиболее часто используемых в агарозном геле и в полиакриламидном геле. Белки с использованием электрофореза в полиакриламидном геле майор.

Электрофорез Устройство состоит из двух частей: Блок питания и электрофорез бак. Источник питания постоянного тока, генерируя электрическое поле по инициативе миграцию заряженных молекул в резервуаре для электрофореза. Электрофорез резервуар может быть разделен на горизонтальных и вертикальных категорий. Вертикальной пластины электрофореза является более распространенной формой, обычно используемый в электрофореза в полиакриламидном геле разделения белка. Промежуточное электрофореза бак зажимают вместе, двумя листами стекла, стеклянные пластины, разделенные полосы на обеих сторонах, в середине стеклянной пластины, полученного в гель-электрофореза, размер геля, как правило, 12 см & Amp; острый; 14 см, толщина 1 мм ~ 2 мм, в последние годы, недавно разработанный электрофорез бак, пластик поверхность меньше, тоньше, короче реагенты для электрофореза и спасти time.When вы положите клей в пластиковой решения гребень гель, после удаления резины полимеризации, образуя канавку на образце. Горизонтальные электрофореза гель лежа на горизонтальной стекла или пластиковой пластины с тонким слоем влажной фильтровальной бумаге и соединен буфера гель-электрофорез, или непосредственно погружен в буфере геля. Поскольку изменение рН заряженных молекул приводит к изменению заряда, влияя тем самым его электрофоретической миграции скорость, так что процесс электрофореза, чтобы проводить в подходящем буфере, буфер может поддерживать стабильное зарядки свойства, чтобы быть изолят.